Hauv cov txheej txheem ntawm kev tshawb nrhiav caj ces, peb feem ntau ntsib cov qauv RNA tsis txaus, piv txwv li, rau kev kawm cov qog nqaij hlav hauv qhov ncauj me me, txawm tias ib leeg-cell kuaj, thiab cov qauv ntawm cov noob hloov pauv tshwj xeeb uas tau sau tseg ntawm qib qis hauv tib neeg lub hlwb.Tau kawg, rau qhov kev sim COVID-19, yog tias cov swabs tsis nyob hauv qhov chaw lossis tsis muaj sijhawm txaus thaum kuaj, tus qauv loj yuav tsawg heev, uas yog vim li cas Pawg Saib Xyuas Kev Noj Qab Haus Huv thiab Tsev Neeg tau tawm ob hnub dhau los thiab dhau qhov kev ntsuam xyuas, thiab yog tias tus nucleic acid sampler tsis tau coj mus rau 6 tus qauv, koj tuaj yeem tshaj tawm nws.
Qhov rhiab heev ntawm cov reagent yog qhov tseem ceeb vim tias peb muaj qhov teeb meem no lossis qhov teeb meem ntawd, yog li peb tuaj yeem ua dab tsi los txhim kho qhov rhiab heev ntawm RT-PCR?
Ua ntej peb tham txog cov kev daws teeb meem, cia peb hais txog ob qhov teeb meem loj nrog qhov xwm txheej peb nyuam qhuav hais.
Ua ntej tshaj plaws, peb txhawj xeeb txog RNA poob thaum peb tsuas muaj ob peb lub xov tooj ntawm tes hauv peb cov qauv.Yog tias siv txoj kev sib cais thiab kev tu ib txwm siv, xws li txoj kev kem lossis txoj hauv kev nucleic acid nag lossis daus, nws muaj peev xwm ua rau ob peb tus qauv yuav ploj.Ib qho kev daws teeb meem yog ntxiv cov cab kuj molecule, xws li tRNA, tab sis txawm li ntawd los, tsis muaj kev lees paub tias peb qhov kev sim rov qab zoo li qub.
Yog li dab tsi yog txoj kev zoo dua?Ib qho kev xaiv zoo rau cov kab lis kev cai lossis cov qauv microanatomical yog siv cov lysis ncaj qha.
Lub tswv yim yog faib cov hlwb rau 5 feeb, tso RNA rau hauv cov kev daws teeb meem, tom qab ntawd nres cov tshuaj tiv thaiv rau 2 feeb, tom qab ntawd ntxiv cov lysate ncaj qha rau cov tshuaj tiv thaiv rov qab kom tsis muaj RNA ploj, thiab thaum kawg muab cov txiaj ntsig cDNA ncaj qha. mus rau hauv lub sijhawm tiag tiag cov tshuaj tiv thaiv.
Tab sis yuav ua li cas yog tias, vim muaj qhov pib tsawg lossis me me ntawm lub hom phiaj gene qhia, peb tuaj yeem rov ua dua tag nrho RNA thiab tseem tsis tau muab cov qauv txaus kom tau txais lub teeb liab zoo hauv lub sijhawm?
Nyob rau hauv cov ntaub ntawv no, lub pre-amplification kauj ruam yuav pab tau heev.
Cov hauv qab no yog ib lub tswv yim los ua kom rhiab heev tom qab kev hloov pauv rov qab.Ua ntej pib, peb yuav tsum nug cov nqes dej uas peb xav tau, txhawm rau tsim cov primers tshwj xeeb rau cov hom phiaj no rau kev nthuav dav ua ntej.
Qhov no tuaj yeem ua tiav los ntawm kev tsim cov primer sib xyaw nrog txog 100 khub ntawm primers thiab lub voj voog cov tshuaj tiv thaiv ntawm 10 mus rau 14 zaug.Yog li ntawd, Master Mix tsim tshwj xeeb rau qhov yuav tsum tau ua yog xav tau los ua ntej kom nthuav dav cDNA tau txais.
Yog vim li cas rau kev teeb tsa lub voj voog ntawm 10 thiab 14 yog tias qhov kev txwv tsawg ntawm cov voj voog no ua kom muaj kev sib txawv ntawm ntau lub hom phiaj, uas yog qhov tseem ceeb rau cov kws tshawb fawb uas xav tau cov ntaub ntawv molecular ntau.
Tom qab kev nthuav dav ua ntej, peb tuaj yeem tau txais ntau qhov ntawm cDNA, yog li qhov kev tshawb pom ntawm lub nraub qaum kawg tau zoo heev, thiab peb tuaj yeem ua rau cov qauv thiab ua ntau yam kev cuam tshuam PCR hauv lub sijhawm kom tshem tawm qhov ua yuam kev random.
Post lub sij hawm: Apr-11-2023